《幼儿园工作规程》第六章“幼儿园的工作人员”中第三十五条规定：幼儿园工作人员应拥护党的基本路线，热爱幼儿教育事业，爱护幼儿，努力学习专业知识和技能，提高文化和专业水平，品德良好、为人师表，忠于职责，身体健康。在第三十八条规定：幼儿园保育员除符合本规程第三十五条规定外，还应具备初中以上学历，并受过幼儿保育职业培训。同时，规定了幼儿园保育员的主要职责，包括：（一）负责本班房舍、设备、环境的清洁卫生工作；（二）在教师指导下，管理幼儿生活，并配合本班教师组织教育活动；（三）在医务人员和本班教师指导下，严格执行幼儿园安全、卫生保健制度；（四）妥善保管幼儿衣物和本班的设备、用具。
依据《幼儿园工作规程》的以上规定，结合幼儿园保育工作的内容，确定幼儿园保育员的工作职责如下：
（一）负责本班室内外卫生清洁工作，为孩子创设清洁、整齐的生活和学习环境。
（二）按照幼儿园卫生消毒制度，做好日常消毒工作，并清洗消毒幼儿在园时弄脏的衣服、被褥等。
（三）妥善管理、保护好本班的一切设施、用品、玩具等。
（四）按时通风，调节室温，保证室内空气清新，做好冬季保暖、夏季降温以及消灭蚊蝇的工作。
（五）负责班级幼儿的饮食，做好正餐及加餐的餐前餐后工作，照顾幼儿饮食。
（六）照顾幼儿睡眠，根据气温变化给幼儿增减衣服和被褥。
（七）协助教师开展教育教学活动，培养幼儿良好的卫生、生活和行为习惯。
（八）做好日常的安全工作，确保幼儿的健康和生命安全。
（九）有节约意识，关心全园的建设与发展，维护集体的荣誉和利益。
（十）服从分配，积极与本班老师合作完成幼儿园交给的各项工作任务。