西晋灭亡后，大批士人南渡，天师道在江南的流传加快，上层士族很多家族都世代信奉天师道。从北方迁来的侨姓士族中如琅琊王氏、高平郗氏、陈郡殷氏、颍川庾氏、阳夏谢氏、谯国桓氏、汝南周氏等都信奉道教。
据《晋书·王羲之传》载“王氏世事张氏五斗米道，凝之弥笃”，学者考证琅琊王氏事奉五斗米道，可上溯至其先祖与方术道士交往的家世渊源。王羲之是王氏家族中信奉天师道的代表人物，王羲之是东晋名相王导的从子，其传记中说他雅好服食养性，他和道士许迈一起“共修服食，采药石不远千里，遍游东中诸郡”[24]。他的儿子王凝之尤为笃信，任会稽内史，遭到孙恩军队的攻击，却不做任何的防备，因为他已祷请大道以鬼兵相助，最终被孙恩所杀。
高平郗氏与王氏世代通婚，郗鉴及其两个儿子都信奉天师道。谢万曾说：“二郗诌于道，二何佞于佛。”[25]二郗所指为郗鉴的两个儿子郗愔和郗昙。王羲之是郗愔的姐夫，他们并有“迈世之风，俱栖心绝谷，修黄老之术”[26]。陈郡殷仲堪也是道教的狂热信奉者，《晋书》本传记载他自小信奉天师道，精心事神，每天都要读《道德论》。
江南吴郡大族中也有许多家族崇信道教，著名者如葛氏、许氏。葛氏中的葛玄、葛洪都是道教中著名的道士。与王羲之交往密切的道士许迈出身丹阳许氏士族，也是世代奉道。许迈不慕仕进，精心道法，曾师事鲍靓。
钱塘杜氏家族也是世奉五斗米道，东晋时杜子恭创立了教团。杜子恭是吴郡钱塘人，通灵有道术，自小信奉天师道，精通符箓禁祝等道术。他能够做到行己精洁，虚心拯物，不求回报。后来他立治宣教。由于他善治病，能够预测人间善恶，因此他的信徒非常多。当时江南豪富之家和权贵之门都事之为弟子，对他非常恭敬。杜子恭本身即出身士族，他与当时的名流都有交往，如王羲之、谢安、桓温等人。谢氏家族中的谢灵运出生后即被送到杜家静室寄养。杜子恭不仅在上层社会有众多信众，在下层民众中更拥有大量的信徒。杜子恭死后，虽然其所创立的教团由他的弟子孙泰统领，但杜氏子孙也仍是世代信奉天师道，南齐的杜京产即杜子恭玄孙，其家族是“世传五斗米道”。